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Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒預實(shí)驗的必要性，通過(guò)預實(shí)驗可以熟悉整個(gè)實(shí)驗的流程，發(fā)現可能忽略的問(wèn)題；可以測試樣本和試劑盒是否匹配，一旦出現不匹配的情況，不至于浪費過(guò)多樣本；可以對樣品中目的分析物的濃度作一下大致參考，以確定合適稀釋度。

　　一、Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒使用注意事項：

1. 室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫（20- 25℃）會(huì )導致數值偏低。

2. 在洗板過(guò)程中如果出現板孔干燥過(guò)久的情況，則會(huì )出現標準曲線(xiàn)不成線(xiàn)性，重復性不好的現象。所以洗板排干后應立即進(jìn)行下一步操作。

3. 標準物質(zhì)和顯色液對光敏感，避免直接暴露在光線(xiàn)下。

4. 混合要均勻，洗板要*（包括加樣品和標準液的時(shí)候都必需充分混合均勻）。

5. 終止液為強酸性物質(zhì)，避免接觸皮膚。

6. 不要使用過(guò)了有效期的試劑盒，也不要混合使用不同批次的試劑盒，這樣會(huì )引起測定結果不準確。

7. 試劑盒的儲存條件是2-8℃，切勿冷凍。

   　　二、剩余試劑的妥善保存：

   酶聯(lián)免疫試劑盒恢復至室溫后，取出要使用的酶標板孔，未使用的酶標板孔應及時(shí)放回鋁箔袋，加入干燥劑，封緊封口，冷藏保存。

   試劑盒常用檢測方法簡(jiǎn)介

   ELISA試劑盒一般適合樣品檢測量大，實(shí)驗室中常用于初篩的檢測方法。若檢測到陽(yáng)性樣本，再用確認方法做準確定量。

   試劑盒檢測方法及優(yōu)點(diǎn)介紹：

   A、間接法：此測定方法與直接法類(lèi)似，差別在于一級抗體沒(méi)有酶標記，改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來(lái)測定抗原量。

   優(yōu)勢：二抗可以加強信號，而且有多種選擇能做不同的測定分析，不加酶標記的一級抗體則能保留它最多的免疫反應性。

   B、直接法：將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標記的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。

   優(yōu)勢：操作手續簡(jiǎn)短，因無(wú)須使用二抗可避免交互反應。

   C、雙抗體夾心法：被檢測的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體，另一個(gè)則是檢測抗體，此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量，或不標記，再透過(guò)酶標記的二級抗體來(lái)測定抗原的量，這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位。